ねえ、仲間のクロマトグラフィー愛好家！のサプライヤーとしてガラスTLCプレート、私はしばしば非常に一般的な質問をされます：「単一のガラスTLCプレートで実行できるサンプルの最大数は何ですか？」さて、このトピックに飛び込み、それを分解しましょう。
まず、TLC、または薄いレイヤークロマトグラフィーが何であるかについてすぐに進みましょう。これは、混合物を分離するために使用されるシンプルでありながら強力なテクニックです。 TLCプレートは、混合物の異なるコンポーネントが動きを示す段階のようなものです。ガラスTLCプレートは、非常に頑丈で、クロマトグラフィープロセス中にかなりの量の摩耗を処理できるため、特に人気があります。
さて、大きな質問に戻ります。 1つのガラスTLCプレート上の最大数のサンプルに対するすべての回答はすべて、サイズ - 適合 - すべての回答はありません。それはいくつかの要因に依存します。
プレートサイズ
ガラスTLCプレートのサイズが主要な要因です。市場には、迅速なテストに便利な小さなものから、より多くのサンプルを処理できる大きなものまで、さまざまなサイズがあります。たとえば2.5 cm x 7.5 cmのプレートは、保持できるサンプルの数の点で非常に限られています。おそらく、最大3〜5サンプルを見ています。それは、分離プロセス中にコンポーネントが混ざり始めないように、各サンプルスポット間に十分なスペースを残す必要があるためです。
一方、20 cm x 20 cmのプレートのような大きなプレートは、かなり多くのサンプルを収容できます。潜在的に15〜20個のサンプルを実行できます。しかし、覚えておいてください、あなたがそれに合うことができるからといって、多くの人が常にそれが最良のアイデアであるという意味ではありません。
スポットサイズ
適用するサンプルスポットのサイズも大きな役割を果たします。マイクロピペットを使用してサンプルを適用し、大きくて太った場所を作っている場合、プレート上の多くのスペースを使い果たします。より小さく、定義されたスポットにより、より多くのサンプルを適合させることができます。理想的には、スポットの直径は約2〜3 mmにする必要があります。これにより、隣接するスポットを干渉することなく、クロマトグラフィープロセス中に広がるのに十分なスペースが得られます。
スポットを大きすぎると、TLCの全体的な目的を打ち負かすスポットが重複する可能性があります。さまざまなサンプルのコンポーネントを明確に区別することはできず、結果は熱い混乱になります。
サンプルの複雑さ
実行しているサンプルの複雑さも重要です。いくつかのコンポーネントしかない単純な混合物を使用している場合は、おそらくより多くのサンプルをプレートに置くことで逃げることができます。しかし、サンプルが複雑で、さまざまなコンポーネントが多い場合、分離中にさらに広がります。これは、サンプルスポットの間にさらにスペースを残して、実行できるサンプルの数を減らす必要があることを意味します。
たとえば、純粋な化合物を分析している場合は、スポットをより近くに配置できます。しかし、さまざまな化学物質の束全体を含む植物抽出物を扱っている場合は、サンプルの数をより保守的にする必要があります。
開発溶媒
使用する開発溶媒の種類は、プレート上のサンプルの数にも影響を与える可能性があります。一部の溶媒により、コンポーネントが他のコンポーネントよりも広がります。極性の高い溶媒により、スポットがより速く移動し、広がります。この場合、サンプル間にスペースを増やして、実行できる最大数を減らす必要があります。
裏側では、極性溶媒が少ないと、よりコンパクトなスポットが発生する可能性があり、プレート上のより多くのサンプルを適合させることができます。したがって、TLC実験を計画している場合は、開発溶媒の特性を考慮する必要があります。
サンプル番号を最大化するためのベストプラクティス
あなたが本当に1つのガラスTLCプレートにできるだけ多くのサンプルを絞ることを探しているなら、ここにいくつかのヒントがあります。まず、細かいチップマイクロピペットを使用して、非常に小さく正確なスポットを適用します。サンプルの発見を開始する前に、プレートがきれいであることを確認してください。プレート上の汚れや破片は、スポットの分離とサイズに影響を与える可能性があります。
サンプルを組織的な方法で配置します。グリッドパターンを使用して、スペースを効率的に使用していることを確認できます。そして、各サンプルスポットにはっきりとラベルを付けることを忘れないでください。これにより、結果を分析すると、頭痛が多くなります。
アルミニウムTLCプレートとの比較
ガラスのTLCプレートがどのように積み重なるか疑問に思うかもしれませんアルミニウムTLCプレート。アルミニウムプレートは、ガラス板よりも柔軟で軽いです。サンプルの数に関しては、同じ要因が適用されます。ただし、アルミニウムプレートにはわずかに多孔質の表面がある場合があり、スポットがもう少し広がる可能性があります。したがって、ガラスのものと比較して、アルミニウムプレートのスポットサイズと間隔にもう少し注意する必要があるかもしれません。
結論として、1つのガラスTLCプレートのサンプルの固定数は固定されていませんが、プレートサイズ、スポットサイズ、サンプルの複雑さ、開発溶媒などの要因を考慮して、実験の最適な数を把握できます。あなたが研究室の研究者であろうと、学生がクロマトグラフィーのロープを学んでいるか、業界で誰かを学ぶかどうかにかかわらず、TLCプレートを最大限に活用することが重要です。
高品質のガラスTLCプレートの市場にいる場合、またはそれらを効果的に使用する方法について質問がある場合は、私たちはここに支援します。お客様の特定のニーズとクロマトグラフィーの旅であなたを支援する方法についての会話を始めるために、お気軽にご連絡ください。
参照
- Snyder、LR、Kirkland、JJ、＆Glajch、JL（2010）。実用的なHPLCメソッド開発。ワイリー。
- Fried、B。、＆Sherma、J。（編）。 （2004）。薄い層クロマトグラフィーのハンドブック。マルセル・デッカー。