ちょっと、そこ！ TLC プレートのサプライヤーとして、私は TLC プレートのサンプル塗布にキャピラリーを使用する最適な方法についてよく質問されます。薄層クロマトグラフィー (TLC) プロセスの小さな部分のように思えるかもしれませんが、実際には、正確で信頼性の高い結果を得るために非常に重要です。それでは、早速本題に入り、プロのように TLC プレート サンプル アプリケーションにキャピラリーを使用する方法について説明しましょう。
まず、キャピラリーとは何か、そしてそれが TLC にとってなぜそれほど重要なのかを理解しましょう。キャピラリーは小さな管で、通常はガラスでできています。適切な量のサンプルを採取し、TLC プレート上に正確に供給できるため、TLC に最適です。この精度は、クロマトグラフィープロセス中にサンプル内のさまざまな成分がどの程度分離されるかに影響するため、重要です。
資料の準備
キャピラリーの使用を開始する前に、必要な材料をすべて集める必要があります。もちろん、TLC プレートが必要です。両方を提供しますガラスTLCプレートそしてアルミニウムTLCプレート。ガラスプレートはより剛性があり、高温に耐えることができますが、アルミニウムプレートはより柔軟で軽量です。特定のニーズに合ったものをお選びください。
サンプルも必要です。適切な溶媒に入っていることを確認してください。溶媒は TLC プレートからすぐに蒸発できるほど揮発性が高い必要がありますが、サンプルをよく溶解する必要もあります。多くのサンプルで一般的な溶媒はメタノールやクロロホルムなどの有機溶媒の混合物ですが、実際の選択はサンプルの性質によって異なります。
そしてもちろん、毛細管も必要です。さまざまなタイプのキャピラリーが利用可能ですが、ほとんどの TLC アプリケーションでは、細い先端を備えた単純なガラス キャピラリーで十分です。これらはほとんどの科学用品店で入手できます。
キャピラリのロード
次に、キャピラリにサンプルをロードする方法について説明します。まず、サンプルがよく混合されていることを確認してください。一貫性のない結果につながる可能性があるため、粒子が底に沈むことは望ましくありません。キャピラリーの先端をサンプル溶液に浸します。液体は毛細管現象によって毛細管内に吸い上げられます (これが名前の由来です)。大量のサンプルを採取する必要はありません。キャピラリー内の液体の小さな柱だけで十分です。
キャピラリーの先端がサンプルを入れた容器の底や側面に触れないよう注意してください。これによりキャピラリーが汚染され、結果に影響を与える可能性があります。また、複数成分のサンプルを使用している場合は、すべての成分がキャピラリー内に正しい比率で存在することを確認するために、毎回ロードする前にサンプルを完全に混合してください。
TLC プレートへのサンプルの適用
キャピラリーをロードしたら、サンプルを TLC プレートに適用します。まず、TLC プレート上にスタートラインをマークします。通常、これはプレートの底から約1〜2 cmです。インクはクロマトグラフィープロセスを妨げる可能性があるため、鉛筆を使用してマークを付けることができます。
キャピラリーを TLC プレートに対して垂直に保ち、キャピラリーの先端をマークされた開始線にそっと触れます。サンプルがプレート上に転写されます。スポットをできるだけ小さく保つようにしてください。スポットが小さいと、サンプル内の成分がより適切に分離されます。スポットが大きすぎると、クロマトグラフィープロセス中に成分が重なり、結果の分析が困難になる可能性があります。
濃度を高めるために、サンプルを複数の小さなアリコートに分けて適用する必要がある場合があります。各塗布後、次のアリコートを塗布する前に溶媒を完全に蒸発させてください。蒸発プロセスを速めるには、穏やかな空気の流れを使用するか、低温の低温設定でヘアドライヤーを使用します。サンプルをプレートから吹き飛ばさないように注意してください。
申請を成功させるためのヒント
ここでは、キャピラリを使用したサンプル アプリケーションをできるだけ成功させるための追加のヒントをいくつか紹介します。
- 清潔に保ってください: キャピラリーと TLC プレートは、常に清潔な手または手袋で扱ってください。油、汚れ、またはその他の物質による手の汚染は、クロマトグラフィーの結果に影響を与える可能性があります。
- 練習すれば完璧になる: TLC サンプル アプリケーションでキャピラリを使用することに慣れていない場合は、コツを掴むまでに数回試す必要があるかもしれません。自信が持てるまで、予備の TLC プレートで簡単なサンプルを使用して練習してください。
- 速度をコントロールする: サンプルを塗布するときは、一定の速度で塗布するようにしてください。ゆっくりと着実に塗布すると、スポットを小さく明確に保つことができます。
- 過負荷を避ける: キャピラリーに過剰な負荷をかけ、一度に大量のサンプルをアプライするよりも、サンプルの濃度を低くして複数回アプライする方が効果的です。過剰な負荷は、分離不良や TLC プレート上での縞模様を引き起こす可能性があります。
トラブルシューティング
時には、物事が計画どおりに進まないこともあります。ここでは、TLC サンプル アプリケーションにキャピラリを使用するときに発生する可能性のある一般的な問題とその解決方法をいくつか示します。
- 大きな斑点または不規則な斑点: スポットが大きすぎる、または不規則な場合は、サンプルの適用が速すぎるか、圧力が強すぎることが原因である可能性があります。サンプルをより優しくゆっくりと塗布してみて、キャピラリーの先端がプレートに対して垂直であることを確認してください。
- サンプル転送なし: サンプルがキャピラリーからプレートに移らない場合は、キャピラリーの先端が詰まっていることが考えられます。容器の端にあるキャピラリーを軽くたたいて、詰まりを取り除いてみてください。これで問題が解決しない場合は、新しいキャピラリーを使用する必要がある場合があります。
- ストリーキング: TLC プレート上の縞は、サンプルの過剰ロードまたはサンプルを十分に溶解しない溶媒の使用によって発生する可能性があります。適用するサンプルの量を減らし、溶媒がサンプルに適切であることを確認してください。
結論
TLC プレートサンプルアプリケーションにキャピラリーを使用することは、薄層クロマトグラフィーにおける重要なスキルです。上記で概説した手順に従うことで、サンプルを正確かつ一貫して適用することができ、より優れた分離とより信頼性の高い結果が得られます。
高品質の TLC プレートをお探しなら、ガラスTLCプレートまたはアルミニウムTLCプレート、私たちはあなたをカバーします。当社は、クロマトグラフィー作業で優れた結果を達成できるよう、最高の製品とサポートを提供することに尽力しています。ご質問がある場合、または TLC プレートの購入に興味がある場合は、調達についてのお問い合わせを遠慮なくお問い合わせください。
参考文献
- LR スナイダー、JJ カークランド、JL グリッチ (2010)。実践的な HPLC メソッドの開発。ワイリー。
- マクマスター、MC (2010)。製薬科学者向けの HPLC。ワイリー - インターサイエンス。